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Elisa試劑盒出廠價  檢測試劑盒原理 呋喃唑酮代謝物檢測Elisa試劑盒

【產(chǎn)品簡介】：呋喃唑酮ELISA檢測試劑盒用于定量檢測樣品中的呋喃唑酮代謝產(chǎn)物的含量。如果要確證，可以采用傳統(tǒng)的檢測方法如：HPLC, GC/MS。

【原理】：

呋喃唑酮（AOZ）ELISA檢測試劑盒的原理是酶聯(lián)免疫，應用于測定呋喃唑酮。在微孔中加入標準和樣品，再加入AOZ-HRP酶結(jié)合物，微孔板包被有呋喃唑酮（AOZ）特異性抗體。這時樣品中的呋喃唑酮和呋喃唑酮酶結(jié)合物競爭于包被在微孔板上的呋喃唑酮抗體結(jié)合。這個反應進行30min。經(jīng)過洗板步驟，加入底物（顯色劑）。通過顯色劑來檢測呋喃唑酮。底物（顯色劑）含有雙氧水和TMB。結(jié)合到呋喃唑酮抗體上的AOZ-HRP酶結(jié)合物催化底物產(chǎn)生有色物質(zhì)。經(jīng)過一個反應期加入稀酸（終止液）終止反應。用酶標儀讀數(shù)。通過繪制標準曲線來測定樣品中AOZ的含量。因為AOZ-HRP酶結(jié)合物和樣品中的AOZ是競爭關(guān)系所以顯色的深淺和樣品中呋喃唑酮的含量成反比。

【性能數(shù)據(jù)】：

敏感性：魚、蝦、雞 0.1 ppb；混合飼料 0.3 ppb

選擇性：這個試劑盒只能測呋喃唑酮不能測定類似的化合物

樣品：需要通過處理樣品來消除基質(zhì)效應

標準曲線：測定時靠近曲線的中間部位取值更為準確。

重復性：標準的變異系數(shù)（CVs） <10%；樣品的變異系數(shù)（CVs） <15%；

交叉反應：

Furazolidone （AOZ） 100%

Furaltadone （AMOZ） <0.01%

Semicarbazide （SEM） <0.01%

1-aminohydantoin （AHD） <0.01%

試劑盒組成

1、真空包裝微孔板（12×8條），包被有AOZ抗體

2、7瓶呋喃唑酮標準液，濃度分別為0, 0.0125, 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 和0.5 ppb, 每瓶1ml。（已經(jīng)衍生化）

3、呋喃唑酮-HRP酶標記物 12ml

4、樣品處理緩沖液（10X ）濃縮，50ml，用于稀釋樣品。

5、洗液/樣品稀釋液（10X ）濃縮，50ml，

6、衍生化試劑 12ml

7、1瓶16mL底物（TMB）

8、1 瓶12mL終止液.

【使用步驟】：

1、在對應的微孔中加入25 μL 標準或衍生化的樣品。做重復。

2、用排槍在每個孔中都加入100μL酶標記物、然后用紙片蓋住微孔，輕輕震蕩微孔板30秒使孔中的液體混勻。

3、在室溫下孵育30分。

4、將孔里的液體倒入合適的容器中，每個微孔至少加入250μL、1×洗液，然后棄掉洗液到合適的容器中，重復洗3次，共四次。在一層厚的吸水紙上拍板，去掉殘留的洗液。

5、使用排槍在每個孔中加入100μL底物顯色液，然后用紙片蓋住微孔，輕輕震蕩微孔板30秒使孔中的液體混勻。在室溫孵育20分。盡量使其不見光。

6、每孔加入100μL終止液。

7、在加入終止液15分鐘時間內(nèi)，用酶標儀在450nm 下讀取每個孔的吸光度值（OD）。

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